Evidence that a Leaf-Disk Test Allows Assessment of Isolate-Specific Resistance in Brassica oleracea Crops Against Downy Mildew (Peronospora parasitica)

A rapid resistance/susceptibility test for Peronospora parasitica (downy mildew) was established by inoculating leaf-disks of four Brassica oleracea accessions. Several conditions were tested: disk disinfection or not, agar medium with or without nutrients and with 50 or 100 ppm of benzimidazole. Using disinfected disks placed on agar (no nutrient and benzimidazole at 50 or 100 ppm), the responses of leaf-disks to four isolates were similar to those obtained using the classical cotyledon test, whereas undesired contaminations occurred in all other conditions. The possible effect of the particular leaf used for obtaining the disks was also studied. In each incompatible interaction tested, disks were resistant whatever the leaf used. In compatible interactions, susceptible phenotypes were observed on disks derived from the six lowest leaves, but disks from upper leaves were resistant. The genetic basis of resistance in a F1 hybrid broccoli was assessed, by testing six isolates on an F2 population derived from this hybrid. The cotyledon test only allows inoculation of two isolates per seedling, whereas many isolates can be tested on each plant by using leaf-disks. The segregation of the resistance to each of the six isolates was analysed: two dominant genes (tightly linked) control resistance to all isolates (one to five isolates; the other to only one isolate).     

磷化氢熏蒸处理对嗜卷书虱不同虫态的致死作用

实验室条件下系统研究了磷化氢(PH3)对储物害虫嗜卷书虱Liposcelis bostrychophila卵、各龄若虫和成虫的致死作用,并选用PH3间歇熏蒸以及PH3与气调交替处理等措施对嗜卷书虱进行处理,比较了不同处理措施对嗜卷书虱种群的控制效果。结果表明,PH3熏蒸处理对嗜卷书虱各虫态有不同的致死效果。对卵而言,24、72和120 h熏蒸处理的LC50分别为0.137、0.045和0.035 mg/L;而24 h熏蒸处理对若虫的LC50在4.285~7.364 μg/L之间,对成虫的LC50为20.404 μg/L;采用25 μg/L的PH3进行24 h熏蒸处理,间隔10 d后再分别进行第2次和第3次熏蒸处理,可以完全控制嗜卷书虱的发生。采用PH3 (12 μg/L)和气调(体积比例为35% CO2,1% O2,64% N2)交替处理能够延缓嗜卷书虱种群抗性的发展,交替处理3~5次可以完全控制嗜卷书虱的发生。     

对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达

在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上，构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库，并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13．5kb大片段，酶切分析得到该片段的物理图谱，BamHI和EcoRI切完成了6．5kb含全长基因的亚克隆，并对这条6．5kb片段亚克隆、测序，序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686)，并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB，扩增产物插入表达载体pET-21b中，诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性，LC50达到7．9μg/ml。     

O3对日光温室黄瓜病虫害的防治效果

通过室内与大田试验，明确O3对日光温室黄瓜病虫害的防治效果。研究结果表明，在病害发生初期，用O3发生器隔天施放O3，每天施放3次，每次40min，间隔20min，O3浓度维持约1mg／kg，施放后7天，对黄瓜霜霉病、白粉病、细菌性角斑病及灰霉病防治效果分别为63．4％、53．6％、68．7％和65．0％。室内施放O3 60s，间隔20min，持续12h，对温室白粉虱、南美斑潜蝇成虫杀伤力为100％。O3对黄瓜植株安全，但随着黄瓜生育期的推进，对O3的忍受能力依次减弱。苗期忍耐O3最大浓度为1～2mg／kg，结果期0．4～1mg/kg，后期0．2～0．4mg／kg。O3防治黄瓜病虫害新技术具有安全、有效、方便、无二次污染等特点，尤其在黄瓜定植前对棚室进行大剂量消毒，可不留死角，且有效地解决了硫磺等药物消毒所造成棚内一些设施的破坏及对生态环境污染的难题，具有广阔的推广应用前景。     

一个与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik~m连锁的SCAR标记的分离

 本研究将以前在稻瘟病菌菌株S1522获得的与决定对水稻品种梅雨明无毒性的基因(AVR-Pik^m)相连锁的1个RAPD标记OPO12₁₀₀₀进行了克隆和鉴定。核苷酸序列测定与分析结果表明:OPO12₁₀₀₀的大小为946个碱基,不含有与已报道的稻瘟病菌Mg-SINE、Fosburry、Magyy、Grasshopper、Pot2以及Pot3等同源的重复序列。根据OPO12₁₀₀₀的核苷酸序列,设计了1对24个核苷酸的特异引物,对无毒表型亲本S1522和毒性表型亲本S159、无毒表型群体基因池、毒性表型基因池以及有性杂交后代108个菌株进行了PCR扩增,所有无毒表型的菌株均能特异性地扩增出1条与OPO12₁₀₀₀大小相同的DNA条带,而毒性表型的菌株除5个重组个体外,均不能扩增出这条特异带。此结果表明,与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik^m连锁的RAPD标记OPO12₁₀₀₀被成功地转化为SCAR标记,为进一步通过染色体步移克隆该无毒基因奠定了基础。     

转基因水稻对稻瘟病的抗性研究

 采用苗期初筛、复筛、抗谱测定和田间自然诱发试验等不同鉴定方法,对经分子检测证明已整合有碱性几丁质酶基因和β-1,3-葡聚精酶基因的22个转化系的转基因水稻植株进行稻瘟病抗性鉴定研究,筛选出对稻瘟病的抗性比原种对照七丝软占有明显提高的一系列转基因水稻品系,其中表现高抗的有来自F4-9转化株系的7个品系。高抗材料的R7代品系,经室内抗谱测定及田间病圃试验结果,仍然表现高抗稻瘟病。本研究通过转基因技术,成功地将优质感病品种改良成高抗品系,研究结果证明了利用基因工程手段培育抗病水稻新品种是一个非常有希望的育种途径。     

亚硫酸氢钠处理减轻低温对温州蜜柑光合作用的影响

 低温胁迫使温州蜜柑叶片的净光合速率(Pn)、光系统Ⅱ的光化学效率(Fv/Fm)及光合电子传递速率(ETR)下降，反映跨膜质子动力势的叶绿素毫秒延迟发光(ms-DIE)减弱，叶片中的ATP含量降低。低温胁迫前，用NaHSO₃ 5 mmol/L涂于叶片表面，可使处理植株叶片的Pn和Fv/Fm分别少下降了11.5%和11.6%，ETR和ATP含量几乎没有下降，ms-DLE的下降幅度减少。可见，在柑橘上施用NaHSO₃能够减轻短期低温对光合机构及光合作用的影响。     

利用PCR技术同时鉴定番茄抗根结线虫和抗斑萎病毒基因

 利用同一PCR反应体系，对分别与番茄抗根结线虫的 基因和抗斑萎病毒(1w V)的Sw一5基因紧密连锁的SCAR标记进行了同时扩增筛选，扩增的特异性片段与单引物扩增片段完全吻合，其中与基因紧密连锁的SCAR1标记为共显性标记，抗感试材均产生750 bp的特异片段，纯合和杂合抗病基因型试材存在 I酶切位点，酶切后分别产生了570 bp、160 bp和750 bp、570 bp、160 bp的不同特异性片段，而感病基因型试材无 I酶切位点；与Sw一5基因紧密连锁的SCAR2标记为显性标记，只有抗病试材扩增出400 bD的特异性片段。经反复验证，结果稳定准确可靠，可用于在同一PCR反应体系中对两个抗病基因进行同时筛选鉴定。     

大白菜细胞核雄性不育基因向自交系97A407的转育

根据复等位基因遗传假说 ,利用大白菜核不育系 9810 9和已知基因型的甲型两用系可育株 99135 2作为不育源 ,以大白菜自交系 97A40 7为目标亲本 ,经过 5个世代的转育 ,获得了具有 97A40 7遗传基因型的新甲型两用系、临时保持系和雄性不育系。